萌发的小麦种子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)和β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15mi...
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萌发的小麦种子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活,但耐热)和β-淀粉酶(不耐热,70℃条件下15min后就失活)。0.60
实验材料:萌发3天的小麦种子
主要器材:麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等
实验目的:测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率
实验步骤:
步骤一:制备不同浓度麦芽糖溶液与斐林试剂生成的标准颜*。取7支洁净试管编号,按表中所示加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热3min,取出后按编号排好。
试剂 | 试管 | ||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
麦芽糖标准溶液(mL) | 0 | 0.2 | 0.6 | 1.0 | 1.4 | 1.6 | 2.0 |
蒸馏水(mL) | X | 1.8 | Y | 1.0 | Z | 0.4 | 0 |
斐林试剂(mL) | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
表中Y代表的数值是______。
步骤二:制取α-淀粉酶溶液
①用_______________________制备淀粉酶溶液。
②将装有淀粉酶溶液的试管置于__________________________,取出后迅速冷却以获得α-淀粉酶溶液。
步骤三:取A、B、C、D四只试管并分别作以下处理。
试管 | A1 | A2 | A3 | B1 | B2 | B3 | C | D |
5%淀粉溶液(mL) | 2 | 2 | 2 | |||||
α-淀粉酶溶液(mL) | 2 | 2 | 2 | 2 | ||||
蒸馏水(mL) | 2 | |||||||
40℃水浴锅中保温(min) | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
步骤四:将A1和B1试管中溶液加入到E1试管中,A2和B2溶液加入到E2试管,A3和B3溶液加入到E3试管, C、D试管中的溶液均加入到F试管中,立即将E1 E2 E3 F试管在40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入________________,并经过___________________________后,观察颜*变化。
结果分析:将E1E2E3试管中的颜*与___________________________进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出a-淀粉酶的催化效率的平均值。
讨论:
(1)实验中F试管所起的具体作用是排除________________________________对实验结果的干扰从而对结果进行校对。
(2)若要测定β-淀粉酶的活*,则需要对步骤________进行改变,具体的*作是将_________________________________________一段时间从而获得β-淀粉酶。
【回答】
步骤一:1.4
步骤二:①萌发的小麦种子
②70℃怛温箱中15min(大于70℃且长于15min也可)
步骤四:2mL斐林试剂 60℃水浴中加热3min
结果分析:1-7号试管
讨论:(1)淀粉酶溶液中还原糖
(2)二 淀粉酶溶液置于pH低于3.6溶液中
知识点:酶与ATP
题型:综合题
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