多聚半乳糖醛*酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于...
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多聚半乳糖醛*酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体*作流程如下图。据图回答下列问题:
(1)若已获取PG的mRNA,可通过________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是____________。
(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有________的培养基进行筛选,理由是______________。之后,还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。
(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与________互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达。若________,则可确定转基因番茄培育成功。
(4)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株,需要用________技术;其中,愈伤组织经________形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加____________________。
【回答】
(1)PG的mRNA在逆转录酶的作用下,逆转录为PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中,目的是大量复制目的基因。(2)根据图示,PG基因*在四环素抗*基因中间,在BamHⅠ酶作用下,四环素抗*基因被破坏了,即重组质粒中含卡那霉素抗*基因,但不含四环素抗*基因,故含有PG基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有卡那霉素的培养基进行筛选。若将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中,可通过观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别细胞壁是否再生。(3)根据图示,导入的目的基因能转录出PG反义RNA,天然PG基因转录产生正常的RNA,这两种RNA能互补结合,从而抑制了PG基因的正常表达。若番茄果实的保质期延长,则确定转基因番茄培育成功。(3)利用植物组织培养技术,将该转基因番茄培育成植株。其中,愈伤组织经再分化形成完整植株。此过程除营养物质外,还必须向培养基中添加植物激素。
*:(1)逆转录法 大量复制目的基因(或克隆目的基因)
(2)卡那霉素 重组质粒中含卡那霉素抗*基因而四环素抗*基因被破坏 是否发生质壁分离
(3)天然的PG基因转录的mRNA 番茄果实的保质期延长
(4)植物组织培养 再分化(或细胞增殖和分化) 植物激素(生长调节剂、生长素和细胞*素)
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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