将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力.以下是与植物疫苗制备过程相关...
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将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力.以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表. 表1 引物对序列表
引物对A | P1 AACTGAAATGTAGCTATC |
引物对B | P2 TTAAGTCCATTACTCTAG |
表2 几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶 | AluⅠ | EcoRⅠ | PstⅠ | SmaⅠ |
切割位点 | AG↓CT TC↑GA | G↓AATTC CTTAA↑G | CTGCA↓G G↑ACGTC | CCC↓GGG GGG↑CCC |
请根据以图表回答下列问题. (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是 基数量和种类来设定.表1根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图.请判断哪一对引物可采用较高的退火温度 . (3)目的基因*入质粒后,不能影响质粒的 .载体构建过程需要的工具酶为 和 (4)图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一*要求 (5)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤6转基因所用的细菌B通常为 . (6)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切,假设所用的酶均可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断. ①采用EcoRI和PstI酶切,得到 种DNA片断. ②采用EcoRI和SmaI酶切,得到 种DNA片段.
【回答】
解:(1)PCR方法扩增目的基因的过程中,需要进行高温解链过程,因此使用的DNA聚合酶要具有耐高温的特*. (2)耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大,因为它们之间形成三个*键,稳定*强.引物B中含C与G的碱基对较多,可采用较高的退火温度. (3) (4)多种限制酶切割,形成不同的切割位点,所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一*要求. (4)植物基因工程中,将目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法,因此常用农杆菌做受体细胞. (5)据图分析,用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段,而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段,且M、N片段间存在Pst I酶切点.因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒,由于保留了Pstl的切割位点,所以可以得到两种DNA分子,而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中,只能产生一种DNA片断. 故*为: (1)耐高温 (2)引物对B (3)复制 限制酶 连接酶 (4)否 (5)农杆菌 (6)①2 ②1
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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