Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治...
问题详情:
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图(图中数字序号表示的是相关过程)。请回答下列有关问题:
(1)过程②利用的技术是______________,过程③中涉及到了基因工程技术,其中作为受体细胞的是____________。
(2)过程③中获取的目的基因是_______________,可以根据该基因的___________________设计引物,利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程,完成基Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有____________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有___________个来源。为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用____________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于___________克隆。
【回答】
早期胚胎培养 ES细胞 (正常的)Rag2基因 脱氧核苷*序列(或碱基对序列或遗传信息) 限制*核*内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶 三 抗Rag2蛋白的抗体 治疗*(或体细胞核移植等)
【解析】
分析题图:图示是利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解,其中①表示核移植过程,②表示早期胚胎培养过程,③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。
(1)结合前面的分析可知,过程②利用的技术是早期胚胎培养,过程③中涉及到了基因工程技术,其中作为受体细胞的是ES细胞。
(2)图示利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,可推知过程③中获取的目的基因是(正常的)Rag2基因。步骤③中,在构建含有Rag2基因的表达载体时,可以根据Rag2基因的脱氧核苷*序列设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。分离、培养ES细胞过程中需要用胰蛋白酶分散细胞。PCR技术扩增过程中用耐高温的DNA聚合酶(Taq酶),基因导入过程中需要用限制*酶核*内切酶和DNA连接酶。
(3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有3个来源:上皮细胞的核基因、卵母细胞的质基因和Rag2基因。为检测Rag2基因的表达情况,可采用抗原-抗体杂交法,即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质(抗原),用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。根据图形分析可知:基因导入在体外进行的,因此,该治疗方式属于体外基因治疗,图中所述克隆技术也属于治疗*克隆。
【点睛】本题以基因治疗的流程图为载体,关键要能识记细胞核移植和胚胎工程的相关知识;熟悉基因工程中PCR技术、目的基因的获取、导入、检测和鉴定等。尤其应注意造血干细胞中遗传物质(基因)的来源。
知识点:基因工程
题型:实验题
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