(6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;...
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(6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号 项目 | I
| Ⅱ
| Ⅲ
| Ⅳ
| V
| Ⅵ
|
蒸馏水(mL) | 2 | O | 1 | 1 | 1 | 1 |
缓冲液(mL) | 0 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
果胶酶液(mL) | O | 0 | O | 0.5 | O | 0 |
蜗牛酶液(mL) | O | 0 | O | O | 0.5 | 0 |
纤维素酶液(mL) | 0 | O | 0 | O | 0 | 0.5 |
实验结果(绿*深浅程度) | - | - | - | +++ | ++++ | ++ |
(注:“+”越多表示绿*越深,“一”表示颜*无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿*的深浅。
(2)从绿*的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组,其设置意义是 。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 洗涤。
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 。
【回答】
(1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果
(2)果胶酶和纤维素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除无关变量的干扰
(3)等渗溶液
(4)低渗涨破法
解析:本题考查有关酶的催化效率的实验,(1)实验过程中,需要轻摇试管,可以使细胞壁与酶充分接触,可以提高酶解效果(2)蜗牛以植物为食,所以唾液酶中含有果胶酶和纤维素酶,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组。其目的是排除无关变量的干扰。(3)离心后收集沉淀物,并用等渗溶液清洗,目的是保持细胞正常形态。(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求,若没有细胞壁则可以涨破,有则不能涨破。
知识点:酶的应用
题型:填空题
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