是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有*入外源基因，LacZ基...

问题详情：

是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有*入外源基因，LacZ基因便可表达出β－半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X－gal时，X－gal便会被β－半乳糖苷酶水解成蓝*，大肠杆菌将形成蓝*菌落，反之，则形成白*菌落。如图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。

请分析并回答：

(1)已获得的目的基因可利用________技术进行扩增。

(2)目的基因*入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复________键。

 (3)将试管Ⅰ中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是________；大肠杆菌需事先用Ca2＋进行处理，目的是____________________________________________。

(4)将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养，培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质________________和生长因子，还应加入IPTG、X－gal以及氨苄青霉素，其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出______________________________________ 。

(5)若观察到培养基上出现________*菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是_______________________________________________________________________。

【回答】

 (1)PCR

(2)**二酯

(3)进行转化　使大肠杆菌细胞处于感受态

(4)碳源、氮源、无机盐、水　导入pUC18质粒的大肠杆菌

(5)白　无论大肠杆菌是否导入重组质粒，均会呈现蓝*菌落

知识点：微生物的利用

题型：填空题