图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制*内切酶EcoRI、BamHI、SamI的酶切位点,P为启动子,...
问题详情:
图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制*内切酶EcoRI、BamHI、SamI的酶切位点,P为启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI、SamI在内的多种酶的酶切位点。外源DNA*入到ampR或tctR中会导致相应的基因失活(ampR表示氨苄青霉素抗*基因,tctR表示四环素抗*基因)。回答下列问题:
(1)目的基因主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些 。在基因工程中使用的载体除质粒外,还有 、动植物病毒等,它们来源不同,在大小、结构、复制以及*入片段大小上也有很大差别。
(2)一般为避免在构建重组质粒时出现自身环化,该质粒用限制酶切割时应该用 酶进行切割,切割过程中消耗了 个水分子。目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称之为 。构建出来的基因表达载体在受体细胞内表达时,RNA聚合酶识别和结合位点是 。
(3)若将此质粒用EcolR I酶切割后,与用EcolR I酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌(大肠杆菌本身不含该质粒),结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有*入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。其中,可在含氨苄青霉素的培养基上生存下来的大肠杆菌是 ,能在同时含氨苄青霉素和四环素的培养基上生存的是 。
(4)假如该质粒载体为来自土壤农杆菌的Ti质粒,将其携带的抗虫基因整合到某植物细胞的染*体DNA上,将该细胞通过植物组织培养技术培育成植株后,发现其并无抗虫特*,其可能的原因是 (答出1种情况即可)
【回答】
(1)具有调控作用的因子 λ噬菌体的衍生物
(2)EcoRI、BamHI酶(2分) 4(2分) 转化(2分) 启动子(或P)
(3)含有质粒载体和含有*入了目的基因的重组质粒的 含有质粒载体
(4)抗虫基因并未表达(或未转录或未翻译);抗虫基因表达的水平极低或产生的抗虫蛋白没有活*(2分)
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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