下表中列出了几种限制酶识别序列及其割位点,图一、图二中箭头表示相关限制酶的位点。请回答下列问题:限制酶BamH...
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其割位点,图一、图二中箭头表示相关限制酶的位点。请回答下列问题:
限制酶 | BamH I | Hind Ⅲ | EcoR I | Sma I |
识别序列及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1) 一个图一所示的质粒分子经Sma I切割前后,分别含有___________个游离的**基团。
(2) 若对图一中质粒进行改造,*入Sma I 酶切位点越多,质粒的稳定*越_____________。
(3) 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma I切割,原因是____________。
(4) 与只是用EcoR I 相比较,使用BamH I和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________。
(5) 为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_______________。
(6) 重组质粒中抗生素抗*基因的作用是为了_____________。
(7) 为了从cDNA 文库中分离获取蔗糖转基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖的能力的大肠杆菌突变体,然后在________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(8)若将某一目的基因转入某一植物的核基因组中,确定该目的基因是否已整合到某一染*体上,方法之一是测定该染*体的___________________。
【回答】
(1)0、2
(2)高
(3)SmaⅠ会破坏质粒的抗*基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接酶
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质
(8)碱基排列顺序
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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