获取目的基因是实施基因工程的第一步,获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用...
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获取目的基因是实施基因工程的第一步,获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用的方式,回答下列问题:
(1)基因文库中cDNA文库与基因组文库相比,前者较小,原因是_________。
(2)PCR过程所依据的原理是_______________,扩增过程需要加入_______________酶。
(3)构建基因表达载体时,目的基因的首端必须含有________,它的作用是___________。
(4)将目的基因导入到植物细胞中有多种方法,请写出两种_________________________。
【回答】
(1). cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的,在这个时期并不是每个基因都进行转录,而基因组文库包含该生物所有的基因 (2). DNA双链复制 (3). 耐高温的DNA聚合(Taq酶) (4). 启动子 (5). 作为RNA聚合酶识别并结合的部位,启动转录过程 (6). 农杆菌转化法、花粉管通道法
【解析】试题分析:基因组文库是指包含某种生物所含有的全部基因组成的基因文库,且含有的基因结构完整,不仅含有能编码蛋白质的编码序列,还含有非编码序列;cDNA文库仅仅是某生物体细胞内提取的部分mRNA为模板,经反转录产生cDNA,其所包含的基因不仅数量少,而且每个基因的结构不完整,即基因中没有启动子、内含子等结构。获取目的基因不仅可以从基因文库中获取,也可以通过PCR技术进行扩增获取,部分短小且碱基序列已知的目的基因还可以通过化学方法合成。基因工程中核心步骤是构建基因表达载体。将目的基因导入植物受体细胞常用农杆菌转化法、花粉管通道法;导入动物受体细胞常用显微注*法;导入微生物细胞常用感受态细胞法。
(1)cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的,而这个时期并不是每个基因都进行转录,基因组文库包含该种生物所有的基因,所以cDNA文库比基因组文库小。
(2)PCR的原理是DNA双链复制;扩增过程是在较高温度下进行的,因此需要加入耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)基因表达载体的组成部分中,首端为启动子,启动子的作用是RNA聚合酶识别并结合的部位,启动转录过程。
(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法,除此之外还有基因*法、花粉管通道法等。
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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