白花蛇舌草是我国民间常用的中草*,科学工作者用RPMI-1640培养基配制出不同浓度的白花蛇舌草提取物(HDE...
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白花蛇舌草是我国民间常用的中草*,科学工作者用RPMI-1640培养基配制出不同浓度的白花蛇舌草提取物(HDE)工作液,分别处理人白血病细胞株(K562),测得线粒体内膜跨膜电位的变化如图1,测得凋亡抑制基因Survivin和原癌基因Bcl-2表达的变化情况如图2. (1)K562细胞是由于______基因发生突变,导致正常细胞的生长和*失控而变成癌细胞. (2)图1中HDE处理______h后K562细胞内线粒体内膜跨膜电位下降最显著.跨膜电位下降影响线粒体的功能,导致______合成停止,并释放调亡诱导因子,最终引起细胞的凋亡或死亡. (3)收集用HDE处理的K562细胞中Survivin和Bcl-2的mRNA,在______酶的作用下合成cDNA,再通过______技术扩增cDNA,然后测定其含量,结果如图2所示.其中对照组的处理是使用等量______.β-Actin基因在各组织和细胞中的表达相对恒定,在PCR中的作用是______.从图2数据可知,用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达______未经处理的细胞. (4)综上所述,HDE可能通过______,抑制抗凋亡基因的表达,从而______K562白血病细胞增殖. (5)如果白花蛇舌草没有明显的毒副作用,依据本实验的结果,用它制*的最佳用量是使人体的血*浓度达到______mL/L.
【回答】
原癌;48;ATP;逆转录;PCR;不含HDE的RPMI-1640培养基;对照;明显低于;降低线粒体内膜跨膜电位;抑制;12.8
解:(1)K562细胞是一种癌细胞,具有无限增值的特点,是细胞内原癌基因发生突变,导致正常细胞的生长和*失控而变成癌细胞. (2)图1中白花蛇舌草提取物HDE处理大约48 h后,K562细胞内线粒体内膜跨膜电位下降明显.从而影响线粒体的功能,导致细胞内ATP 合成停止,并释放调亡诱导因子,最终引起细胞的凋亡或死亡. (3)实验组中获得的mRNA在逆转录 酶的作用下,通过逆转录过程可用合成cDNA,然后通过PCR 技术扩增cDNA,获得大量的cDNA.其对照组使用的是等量不含HDE的RPMI-1640培养基.根据题意分析β-Actin基因在PCR中起对照作用.从图2数据可知,用HDE处理2周的K562细胞中Survivin和Bcl-2的表达明显低于未经处理的细胞. (4)根据以上分析控制HDE可能通过降低线粒体内膜跨膜电位,抑制抗凋亡基因的表达,从而抑制K562白血病细胞增殖. (5)图中12.8效果最明显,即用它制*的最佳用量是使人体的血*浓度达到12.8mL/L. 故*为: (1)原癌 (2)48 ATP (3)逆转录 PCR 不含HDE的RPMI-1640培养基对照明显低于 (4)降低线粒体内膜跨膜电位 抑制 (5)12.8 分析图1:图中在每个时间内随着白花蛇舌草提取物浓度的增加,电位变化逐渐增加,同一白花蛇舌草提取物度下随着时间的推移,电位变化先增加后减少,据此答题. 本题的知识点是探究癌细胞防治的机理,主要考查学生的识图能力,评价并完善实验步骤,分析实验结果获取结论的能力和根据提供信息 进行推理的能力.
知识点:细胞的分化 癌变 衰老和凋亡
题型:综合题
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