测定生物组织中ATP的含量,常常利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”。该方法的主要步骤如下:①将所测生物组织研磨...
问题详情:
测定生物组织中ATP的含量,常常利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”。该方法的主要步骤如下:①将所测生物组织研磨后沸水浴10分钟,然后冷却至室温;②离心处理后取一定量的上清液放人分光光度计(测定发光强度的仪器)反应室内,并加人适量的荧光素和荧光素酶,在适宜条件下进行反应,③记录发光强度并计算ATp含量。分析上述实验步骤并回答问题:
(1)荧光素在 和ATP等物质的参与下可进行反应发出荧光。根据发光强度可以计算出生物组织中ATP的含量,原因是: 。
(2)分光光度计反应室内必须控制两个影响酶活*的反应条件,分别是 和pH,维持溶液pH的相对稳定时常常使用 。分光光度计反应室内发生的能量转换是 。
(3)为了节省实验中荧光素酶的用量,科研人员测得荧光素酶浓度与发光强度的关系如右图所示。结果表明,测定ATP时,图中 点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度。e、f、*所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度不再提高,此时的限制因素有 。
(4)利用“荧光素—荧光素酶生物发光法”可检测熟食食品中细菌的ATP含量,进而测算出细菌数量以判断食品的污染程度。做出这种判断的理由是:每个细菌细胞中ATP的含量 。
【回答】
(1)荧光素酶 发光强度与ATP的含量成正比
(2)温度 (**)缓冲液 化学能→光能
(3)荧光素浓度、ATP浓度(2分,答对一点给l分,答对两点给2分)
(4)大致相同且相对稳定
知识点:酶与ATP
题型:填空题
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