斑马鱼的酶D由17号染*体上的D基因编码。利用转基因技术将绿*荧光蛋白基因(G)整合到斑马鱼17号染*体上,带...
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斑马鱼的酶D由17号染*体上的D基因编码。利用转基因技术将绿*荧光蛋白基因(G)整合到斑马鱼17号染*体上,带有G基因的胚胎能够发出绿*荧光。具有纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红*荧光。未整合G基因的染*体的对应位点表示为g。图1和图2所示分别为实验所用的质粒上相关酶切位点以及含绿*荧光蛋白基因(G)的外源DNA片段上具有的相关酶切位点。
(1)将绿*荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼17号染*体上的实验过程中,首先要将G基因与质粒重组,此过程需要的两种工具酶是 。
(2)经筛选获得的重组质粒需要经显微注*到斑马鱼的 细胞中加以培养、筛选。如果培养得到的胚胎能 ,说明G基因已经成功整合到染*体上并且该基因已经得以表达。
(3)用图1中的质粒和图2外源DNA构建重组质粒,不能使用 切割,原因是 。如果要防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,则应选择下列方法 为好。
①只使用EcoR I处理 ②使用BamH I和Sma I同时处理
③使用BamH I和Hind III ④使用Sma I和Hind III同时处理
(4)现用转基因个体N和个体M进行如下杂交实验得到的子代胚胎表现型如图3所示,推测亲代M的基因型是 。
(5)杂交后,出现红·绿荧光(既有红*又有绿*荧光)胚胎的原因是 ,导致染*体上的基因重组。(提示:哪一亲本在什么生理过程中发生什么行为)
(6)子代中只发出绿*荧光的胚胎基因型包括 (选填选项前的序号,可多选,①DDGG ②DDGg ③DdGg ④DdGG),并画出其染*体上相关基因组成的图解。
【回答】
(1)限制*核*内切酶(限制酶)和DNA连接酶
(2)受精卵(早期胚胎) 发出绿*荧光
(3)SmaⅠ SmaⅠ会破坏质粒的抗*基因和外源DNA中的目的基因 ③
(4)Ddgg
(5)亲代N的初级精(卵)母细胞在减数*过程中,同源染*体的非姐妹染*单体发生了交换
(6)②、③ 或 或
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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