内皮素(ET)是一种含21个氨基*的多肽.内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应.ETA是...
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内皮素(ET)是一种含21个氨基*的多肽.内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应.ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础.其过程如图(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG).请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是 .
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使 键断开,形成的黏*末端是 .用两种限制酶切割,获得不同的黏*末端,其主要目的是 .
(3)过程④中需要 酶,去构建重组质粒.过程⑥中,要用 预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界的DNA.
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 .
(5)人皮肤黑*素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑*素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑*素细胞的分化、增殖并激活酪氨*酶的活*,从而使黑*素急剧增加.美容时可以利用注*ETA达到美白祛斑效果,试解释原因: 抑制了内皮素对黑*素细胞的增殖和黑*素的形成.
【回答】
解:(1)图中1过程是逆转录过程,需要逆转录酶的催化;与过程2相比,该过程特有的碱基配对方式是U﹣A.
(2)过程3利用限制酶XhoⅠ切割DNA获得目的基因的过程,限制酶使得DNA的**二酯键断开,形成的黏*末端是﹣AGCT(或).图中显示利用了两种限制酶切割目的基因和载体,从而获得了不同的黏*末端,可以使目的基因定向连接到载体上.
(3)基因表达载体构建构成中,需要用DNA连接酶连接目的基因和质粒.过程6重组质粒导入受体细胞的过程,要用Ca2+(或CaCl2)预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态.
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,可以检测ETA基因能否表达及表达量.
(5)ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑*素细胞膜上内皮素受体的结合,抑制了内皮素对黑*素细胞的增值和黑*素的形成,从而达到美容的目的.
故*为:
(1)逆转录酶
(2)**二酯 可以使目的基因定向连接到载体上
(3)DNA连接酶 Ca2+(或CaCl2)
(4)检测ETA基因能否表达及表达量
(5)ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑*素细胞膜上内皮素受体的结合
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题
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