利用基因工程技术培育转基因抗冻番茄，该过程需要用多种限制酶，如图依次表示EcoRI、SmaI、NaeI三种限制...

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利用基因工程技术培育转基因抗冻番茄，该过程需要用多种限制酶，如图依次表示EcoR I、Sma I、Nae I三种限制酶的识别序列及切割位点，

请回答：

（1）上述限制酶在特定位点切割DNA，其实质是断开DNA分子每条链中特定部位的两个核苷*之间的

_________，切割后产生了_________末端。 （2）利用EcoR I 和Nae I酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因，可与被EcoR I 和Sam I酶切后的质料连接成重组质料，原因是______________________________________________________。 （3）重组质粒导入番茄后，欲检测抗冻蛋白基因是否转录出mRNA，需利用_________作探针。 （4）利用抗冻蛋白制备出相应的_________，然后进行抗原-抗体杂交，观察到杂交带出现，尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功。因此，还应将转基因番茄_________，以确定其耐寒能力是否提高。

（5）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的_________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是____________________________________。

【回答】

（1）**二酯键    黏*末端和平末端（答对一个给1分，答对两个给2分）

（2）相同的黏*末端之间可连接，且不同的平末端之间也可以连接

（3）标记的含有目的基因的DNA片段（或“标记的抗冻蛋白基因”或“标记的含有目的基因的DNA单链”）

（4）抗体    置于寒冷环境培养（或进行个体水平检测或进行抗冻实验）

（5）核苷*（或脱氧核苷*或碱基）       目的基因的两条脱氧核苷*链（或目的基因）

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题