在植物基因工程中，通常借助标记基因来达到选择的目的，但某些标记基因的存在可能引起其他问题。研究表明，在一定条件...

问题详情：

在植物基因工程中，通常借助标记基因来达到选择的目的，但某些标记基因的存在可能引起其他问题。研究表明，在一定条件下用农杆菌转化法转化植物时，一个Ti质粒中的两段T-DNA可分别整合到染*体不同位点上。科学家利用此研究成果培育出了不带hpt（抗潮霉素基因）的抗虫转基因籼稻。回答下列问题。

（1）在成功构建的重组Ti质粒中，hpt与抗虫基因在Ti质粒中应排列在____。（填“同一段”或“两段”）T-DNA上。

（2）取籼稻的幼胚进行____处理后，接种到培养基上培养，幼胚细胞通过____形成愈伤组织，随后用含重组Ti质粒的农杆菌侵染该愈伤组织，然后转接到含有____的培养基进行初次筛选，获得转基因的愈伤组织后，再转接到含有____（植物激素）的分化培养基培养出幼苗，移栽后继续培养成植株。

（3）对所得植株进行连续自交，通过____和____对后代进行筛选，最终可获得不带hpt的抗虫转基因籼稻。

（4）与种植携带hpt的抗虫转基因籼稻相比，种植上述不带hpt的抗虫转基因籼稻的优点是________（写出l点即可）。

【回答】

同一段    脱分化    诱导    潮霉素    赤霉素    DNA分子杂交    抗虫接种实验    不产生基因污染   

【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因*法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注*法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染*体的DNA是否*入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活*鉴定等。

农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染*体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因*入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染*体的DNA上。

【详解】

（1）在构建重组Ti质粒时，将hpt与抗虫基因排列在Ti质粒的同一段T-DNA上，以便同时导入受体细胞并进行筛选。

（2）将籼稻的幼胚接种到诱导培养基上，经过脱分化过程，培养出愈伤组织，然后用农杆菌转化法，将hpt与抗虫基因整合到愈伤组织细胞的染*体DNA上，再将该愈伤组织转接到含有潮霉素的培养基上进行筛选，获得的转基因愈伤组织再转接到含有赤霉素的分化培养基培养出幼苗，移栽后继续培养成植株。

（3）以上过程获得的导入hpt与抗虫基因的植株，相当于两对基因的杂合子，对其进行连续自交，后代会出现不带hpt的抗虫转基因籼稻，再通过DNA分子杂交技术和抗虫接种实验将其筛选出来。

（4）与种植携带hpt的抗虫转基因籼稻相比，种植上述不带hpt的抗虫转基因籼稻可以避免基因污染。

【点睛】

本题结合转基因抗虫籼稻的培育过程，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及*作步骤，植物组织培养的过程，掌握各*作步骤中的相关细节，能结合题中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。

知识点：细胞工程

题型：综合题