科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(prC)，该基因能激发许多动物细胞*，这为单克隆抗...

问题详情：

科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(prC)，该基因能激发许多动物细胞*，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答以下问题。

(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是________________。

(2)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是________________，第2次筛选的目的是_______ 。

(3)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：

①酶A是指________，酶B是指________。

②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是___________ ；题目中Ⅱ所指的细胞是________，Ⅲ所指的细胞具有的特点是__________ 。

③若将目的基因转入胚胎干细胞中，胚胎干细胞也能够发育成转基因动物，所依据的生物学原理是________。胚胎干细胞在体外培养的条件下可以增殖而不发生________，但通过体外定向诱导，能培育出人造________________。

(4)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：

【回答】

【解析】　(1)动物细胞融合的诱导有三种方法：物理方法(如电刺激，振动等)；化学方法(如聚乙二醇)；生物方法(如灭活的病毒)。制备单克隆抗体，促进动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒。

(2)融合时可能出现4种情况，即：①未发生融合的细胞(B淋巴细胞、骨髓瘤细胞)；②自身融合细胞(B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞)；③多细胞融合(多个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合)；④杂交瘤细胞(单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成)。在上述4种情况下，细胞中杂交瘤细胞是制备单克隆抗体所必需的，因此，用特定的选择*培养基从不同类型的细胞中筛选出杂交瘤细胞即为第一次筛选。将某种抗原注入小鼠体内后，产生的效应B细胞就会有多种，经过融合后第一次筛选获得的杂交瘤细胞也就有多种，必须从中筛选出能产生人们所需抗体的特定的杂交瘤细胞，此为第二次筛选。

(3)①读图知酶A将目的基因及质粒进行了切割即是指限制酶，酶B是表达载体构建时需要的DNA连接酶。

②对导入重组质粒的受体细胞进行检测的目的在于导入的目的基因是否能在受体细胞中表达。因此此工程技术制备的是单克隆抗体，所以受体细胞应该是浆细胞。Ⅲ所指的细胞既可大量增殖又能产生特异*抗体。

③胚胎干细胞经过培养发生了细胞的*、分化最终形成一个完整的生物体，依据的原理是细胞的全能*；胚胎干细胞在体外培养时通过控制条件可只*而不分化。

(4)细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体时，应将可发生大量增殖的细胞(如骨髓瘤细胞)的细胞核去除后利用其细胞质，与被特定抗原刺激后产生的浆细胞的细胞核发生融合重组后，再进行体外培养。

【*】　(1)灭活的病毒　(2)筛选出杂交瘤细胞　筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞　(3)①限制(*核*内切)酶　DNA连接酶

②检测目的基因在受体细胞中是否进行了表达(或检测受体细胞是否显示出目的基因控制的*状)　浆细胞　既能大量增殖又能产生特定抗体

③细胞的全能*　分化　器官和组织

(4)如图

知识点：细胞工程

题型：综合题