R­7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列(3′­UTR)结合，进而影响基...

问题详情：

R­7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列(3′­UTR)结合，进而影响基因的表达。为研究R­7是否影响家蚕基因B(调控家蚕眼睛发育)的表达，科研人员将基因B中对应3′­UTR的DNA片段与荧光素酶基因(R­7不影响荧光素酶基因的表达)重组后导入家蚕胚胎细胞观察其表达结果。请回答下列问题：

（1）利用________技术扩增基因B中对应3′­UTR的DNA片段，应先依据___________合成引物。若对一个含基因B的DNA扩增n代，则共需消耗________对引物。

（2）图*中对应3′­UTR的DNA片段应*入到位点__________，原因是___________。重组载体中的荧光素酶基因在基因工程中作为________。

（3）科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质，经处理检测后获得相对荧光值(在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光)，其结果如图乙所示。

①实验组为将重组载体导入含R­7的家蚕胚胎细胞中，对照组1的处理为将含有荧光素酶基因的表达载体(不含对应3′­UTR的DNA片段)导入含R­7的家蚕胚胎细胞中，则对照组2的处理应为________________________________________________。

②依据实验结果可推知，R­7影响基因B的表达，即通过遵循________________原则，R­7与基因B所转录的mRNA的3′­UTR结合，进而________(填“促进”或“抑制”)基因B的表达。

【回答】

PCR    该基因的一段核苷*序列    2n－1    2    目的基因应*入到启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因标记基因将重组载体导入不含(或去除)R­7的家蚕胚胎细胞中碱基互补配对抑制

【解析】

（1）利用PCR技术扩增基因B中对应3′­UTR的DNA片段，利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷*序列，以便根据这一序列合成引物。因此该空白的*为：应先依据该基因的一段核苷*序列合成引物。若对一个含基因B的DNA扩增n代，共得到2n个DNA，净增DNA为2n-1,因此共需消耗的引物为2n－1个。

（2）依题意可知，R­7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA尾端的一段非编码序列(3′­UTR)结合，进而影响基因的表达。也即3′­UTR位于某些mRNA的尾端，由于mRNA是以DNA分子的一条链为模板转录而来的，因此图*中对应3′­UTR的DNA片段应*入到位点2，原因是目的基因应*入到启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因，重组载体中的荧光素酶基因在基因工程中作为标记基因。

（3）①由图乙可知实验组的相对荧光值较低，而对照组1和对照组2的相对荧光值较高。又因为对照组1的的处理为将含有荧光素酶基因的表达载体(不含对应3′­UTR的DNA片段)导入含R­7的家蚕胚胎细胞中，说明没有R­7片段的细胞中荧光素酶基因正常表达，相对荧光值较高。实验组为将重组载体导入含R­7的家蚕胚胎细胞中，相对荧光值较低，说明R­7抑制了荧光素酶基因的表达。由此可以推测对照组2的处理应为将重组载体导入不含(或去除)R­7的家蚕胚胎细胞中。

②基因的表达包括转录和翻译，在转录和翻译的过程中都遵循碱基互补配对原则。依据实验结果可推知，R­7影响基因B的表达，即通过遵循碱基互补配对原则，R­7与基因B所转录的mRNA的3′­UTR结合，进而抑制基因B的表达。

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：综合题